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免疫磁珠 免疫磁珠（Immunomagnetic bead, IMB） 簡(jiǎn)稱磁珠,免疫磁珠由載體微球和免疫配基結(jié)合而成。免疫磁珠的大小和形狀的均一性, 可使靶細(xì)胞迅速和有效地結(jié)合到磁珠上; 它的球形結(jié)構(gòu)可消除與不規(guī)則形狀粒子有關(guān)的非特異性結(jié)合; 超順磁性可使磁珠置于磁場(chǎng)時(shí), 顯示其磁性, 從磁場(chǎng)移出時(shí), 磁性消除, 磁珠分散; 保護(hù)性殼可防止金屬顆粒漏出。

將磁珠按磁珠功能基結(jié)合的蛋白質(zhì)不同分為: 包被一抗的磁珠、包被二抗的磁珠、未包被的磁珠和包被抗生物素的磁珠。并針對(duì)不同抗原制出包被相應(yīng)抗體的試劑盒,方便了使用。

免疫磁珠的主要特點(diǎn)有: 分離速度快、效率高、可重復(fù)性好; 操作簡(jiǎn)單、不需要昂貴的儀器設(shè)備;不影響被分離細(xì)胞或其它生物材料的生物學(xué)性狀和功能

免疫磁珠標(biāo)記方法 1 直接磁珠和直接標(biāo)記法：通過(guò)物理吸附和共價(jià)鍵結(jié)合直接將特意性抗體與磁珠耦合，然后再與相應(yīng)細(xì)胞結(jié)合，形成細(xì)胞-抗原-抗體-磁珠復(fù)合物，在外磁場(chǎng)下直接分離目的細(xì)胞。快速、簡(jiǎn)單、特異性和細(xì)胞得率高，靈敏度低，需制備相應(yīng)的偶聯(lián)抗體磁珠。2 間接磁珠和間接標(biāo)記法：使用anti-lg等與磁珠偶聯(lián)，通過(guò)Anti-lg再使磁珠與二抗體偶聯(lián)，分離細(xì)胞時(shí)，先使細(xì)胞與一抗特異性結(jié)合，然后在與一抗標(biāo)記磁珠結(jié)合，形成細(xì)胞-1抗-2抗-anti-lg-磁珠復(fù)合體，在外磁場(chǎng)下分離目的細(xì)胞的方法。該法增加了細(xì)胞的洗滌步驟，特異性也會(huì)降低。該法一般用于①?zèng)]有直標(biāo)磁珠抗體②需用幾種抗體去除多種細(xì)胞③目的細(xì)胞上特異性抗原分子表達(dá)水平低。

免疫磁珠分選方法 陽(yáng)性分選：運(yùn)用特異性抗體偶聯(lián)磁珠直接從細(xì)胞混合物中分離目的細(xì)胞的分選方法稱為positive selection. 陽(yáng)性分選中磁珠標(biāo)記的細(xì)胞即為目的細(xì)胞。該法簡(jiǎn)單、快速、細(xì)胞得率和純度較高。如采用anti-CD14磁珠分選CD14+巨噬細(xì)胞。陰性分選：用抗體偶聯(lián)磁珠去除無(wú)關(guān)細(xì)胞，使目的細(xì)胞得以純化和分離的分選方法稱為negative selection.陰性分選中磁珠標(biāo)記的細(xì)胞為非目的細(xì)胞。如分離CD4+T細(xì)胞時(shí)，由于沒(méi)有專用的CD4+T細(xì)胞分選磁珠，可通過(guò)anti-CD8、 anti-B220、 anti-CD49b、 anti-CD11b、 anti-Ter119標(biāo)記磁珠去除CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞、DC細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞等，最終而獲得較純的CD4+T細(xì)胞。因此陰性分選法適用于：①?gòu)募?xì)胞混合物中去除某種類型細(xì)胞。如腫瘤細(xì)胞。②缺乏針對(duì)目的細(xì)胞篩選的特異性抗體磁珠時(shí)。③抗體和目的細(xì)胞結(jié)合可能誘導(dǎo)細(xì)胞活化，影響后續(xù)細(xì)胞功能分析時(shí)。復(fù)合分選：將陰性分選和陽(yáng)性分選相結(jié)合的分選方法。當(dāng)目的細(xì)胞含量特別低，無(wú)法直接進(jìn)行陽(yáng)性分選時(shí)，可采用陰性分選發(fā)先出去其他雜細(xì)胞，當(dāng)目的細(xì)胞富集到一定程度時(shí)在采用陽(yáng)性分選發(fā)篩選目的細(xì)胞。

免疫磁珠分離技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是:分離速度快、效率高、可重復(fù)性好、操作簡(jiǎn)單，不需昂貴儀器設(shè)備,不影響被分離細(xì)胞或其它生物材料的生物學(xué)性狀和功能等,從而在微生物檢測(cè)方面具有很大的優(yōu)勢(shì)。缺點(diǎn)：免疫磁珠敏感性不高，易于其他雜菌交叉反應(yīng)，價(jià)格昂貴，應(yīng)用受到一定限制。

免疫磁珠分離技術(shù)的發(fā)展方向：高敏感性磁珠的制造技術(shù)，降低磁珠生產(chǎn)成本，免疫磁珠與其它檢測(cè)手段聯(lián)用技術(shù)，免疫磁珠技術(shù)應(yīng)用技術(shù)， 總的來(lái)說(shuō)，免疫磁珠分離技術(shù)未來(lái)將在生物醫(yī)學(xué)、食品、農(nóng)業(yè)科研、新藥開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域具有更加廣泛的發(fā)展前景。